摘 要：本文以栀子为材料，OD比值为指标，研究乙醇浓度、温度和时间对栀子黄色素提取效果影响，优化栀子黄色素提取工艺。以藏花素为对照品，用分光光度法测不同产地栀子中栀子黄色素含量和色价，评价不同产地栀子的品质。用大孔树脂AB-8纯化色素，研究高色价栀子黄色素的制备。得到结果：栀子黄色素最佳提取条件为60%乙醇，于40℃静置浸提60 min;山栀子中栀子黄色素含量(13.07%)低于水栀子(平均为19.37%)，栀子黄色素含量存在品种差异;经纯化，栀子黄色素色价平均提高了3倍左右，通过纯化可获得高品质栀子黄色素。
关键词：栀子黄色素;提取工艺;含量;色价
栀子是茜草科植物栀子的成熟果实，具有护肝、利胆、降压等多种药理作用，是我国传统中药，在国内分布广泛[1]。栀子黄色素是从栀子中提取的一种优良水溶性天然色素，属类胡萝卜素，主要成分是藏花素[3]，因其着色自然、性质稳定且具有一定的医疗保健作用而广泛应用于食品行业。工艺流程为果实粉碎、浸提、浓缩和纯化[5]，优良的提取工艺结合后续高效的纯化加工过程才能实现栀子黄色素的高效优质生产。因此，优化栀子黄色素提取工艺，提高色素提取效率和纯度，具有重要实践意义。
1 栀子黄色素提取的材料与方法
1.1 材料
栀子采自湖北省孝感市和长阳县栀子种植基地，经华中农业大学药用植物研究所王沫教授鉴定，分别为山栀子和水栀子的干燥果实。
藏红素标品(东京化成工业株式会社)、大孔树脂AB-8(天津市光复精细化工研究所)、梅特勒万分之一天枰、N-1100旋转蒸发仪、PK-BD恒温水浴锅、紫外可见分光光度计、80-2台式离心机。
1.2 方法
1.2.1 提取前处理栀子经剔除杂物、次果，于45℃烘干至恒重，粉碎，过40目筛，密封避光保存备用。
1.2.2 提取工艺优化准确称取0.5 g栀子粉末于具塞三角瓶中，料液比1:10加入乙醇溶液，采用一次浸提方式，提取30 min，离心，取上清液并稀释到适当浓度后，分光光度计测其在238 nm和440 nm处吸光值并计算OD比值，每处理3次重复，选取最佳乙醇提取浓度。同样的方法考察浸提方式、时间和温度对栀子黄色素提取效果的.影响。
1.2.3 方差分析试验数据统计分析采用SPSS19.0软件，用ANOVA(analysis of variance，LSD检验法)进行方差分析。
1.2.4 绘制标准曲线精密称取藏花素对照品，用60%乙醇溶解并配置成浓度分别为0、0.0224、0.0448、0.0672、0.0896、0.112mgmL-1的藏花素对照溶液，以溶剂为空白对照，测其在440 nm的吸光值，以浓度为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线，并给出回归方程。
2 栀子黄色素提取的结果与分析
2.1 乙醇浓度与栀子黄色素提取效应
乙醇浓度对栀子黄色素提取有显著影响(p﹤0.05)，浓度高于25%时，随着醇浓度增大，所得栀子黄色素的A238nm值和A440nm值增大，但同时OD比值也明显增大(见表1)。以OD比值相对较小，同时A440值相对较大综合考虑，60%乙醇为栀子黄色素最佳提取溶剂条件。
表1 乙醇浓度对栀子黄色素提取的影响
乙醇浓度(%)A238nmA440nmOD比值
250.53±0.003c
0.36±0.058d0.19±0.0088d
0.27±0.0067b2.789±0.1436ad
1.333±0.0175c
600.55±0.093c0.36±0.0116a1.528±0.0268bc
750.69±0.033b0.38±0.0067a1.816±0.0802b
950.80±0.040a0.27±0.0195bc2.963±0.1903a
2.2 浸提方式和时间与栀子黄色素提取效应
以60%乙醇为溶剂，室温条件下，静置和震荡(140r·min-1)两种浸提方式所得栀子黄色素在440 nm处吸光值及OD比值没有显著差异(p﹤0.05)，且在150 min内，静置或震荡时间的延长不影响栀子黄色素提取效应(见表2)。
表2 浸提方式和时间对栀子黄色素提取的影响
提取时间A238nmA440nmOD比值
震荡静置震荡静置震荡静置
30min0.76±0.00860.68±0.010.44±0.00710.39±0.00821.74±0.0551.73±0.053
60min0.74±0.0280.74±0.00840.42±0.0150.42±0.00441.77±0.00481.75±0.005
90min0.76±0.0120.79±0.00280.43±0.00230.45±0.0051.74±0.0181.77±0.014
120min0.78±0.0120.73±0.00870.45±0.0110.42±0.00611.74±0.0381.73±0.0069
150min0.78±0.00530.74±0.010.44±0.00680.42±0.00561.76±0.0171.75±0.0025
3 结论与讨论
乙醇浓度对栀子黄色素提取效应有显著影响，浸提方式和时间对栀子黄色素提取效果无显著影响，栀子黄色素表现出良好